激光共聚焦顯微鏡是一種高科技顯微鏡;以熒光顯微鏡成像為基礎(chǔ),加裝了激光掃描裝置,計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖像處理,使用紫外或可見(jiàn)光激發(fā)熒光探針,得到細(xì)胞或組織內(nèi)部細(xì)微結(jié)構(gòu)的熒光圖像。
原理:
激光共聚焦顯微鏡利用放置在激光光源后的照明針孔和放置在檢測(cè)器前的探測(cè)針孔,實(shí)現(xiàn)點(diǎn)照明和點(diǎn)探測(cè)。激光光源通過(guò)照明針孔發(fā)射出的光,聚焦在樣品焦平面的某個(gè)點(diǎn)上,該點(diǎn)所發(fā)射的熒光在探測(cè)針孔上成像,該點(diǎn)以外的任何發(fā)射光均被探測(cè)針孔阻擋。照明針孔與探測(cè)針孔對(duì)被照射點(diǎn)或被探測(cè)點(diǎn)來(lái)說(shuō)是共軛的,因此被探測(cè)點(diǎn)即共焦點(diǎn),被探測(cè)點(diǎn)所在的平面即共焦平面。計(jì)算機(jī)以“像點(diǎn)”的方式將被探測(cè)點(diǎn)顯示在計(jì)算機(jī)屏幕上,為了產(chǎn)生一幅完整的圖像,由光路中的掃描系統(tǒng)在樣品焦平面上掃描,從而產(chǎn)生一幅完整的共焦圖像。只要載物臺(tái)沿著Z軸上下移動(dòng),將樣品新的一個(gè)層面移動(dòng)到共焦平面上,樣品的新層面又成像在顯示器上,隨著Z軸的不斷移動(dòng),就可得到樣品不同層面連續(xù)的光切圖像。