超分辨顯微鏡的多個(gè)模式各自具有不同的適用范圍,以下是對(duì)其中幾種常見(jiàn)模式的介紹:
GI-SIM(掠入射結(jié)構(gòu)光照明超分辨成像模式):此模式特別適用于拍攝細(xì)胞內(nèi)的大量細(xì)胞器,尤其是當(dāng)拍攝厚度大于700 nm時(shí)。其高分辨率的成像能力使得它在研究細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)和動(dòng)態(tài)互作中具有顯著優(yōu)勢(shì)。
3D-SIM(三維結(jié)構(gòu)光照明超分辨成像模式):該模式在軸向上提供兩倍于寬場(chǎng)的超分辨成像,其軸向分辨率約為350 nm。這使得它非常適合用于觀察三維結(jié)構(gòu),尤其是需要高軸向分辨率的樣品,如細(xì)胞骨架、亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)等。
TIRF(標(biāo)準(zhǔn)全內(nèi)反射照明成像模式):全內(nèi)反射熒光顯微鏡(TIRFM)主要用于細(xì)胞膜表面的生物學(xué)事件觀察,如囊泡釋放、細(xì)胞胞吞現(xiàn)象等。由于其能夠極大地減少背景熒光,提高信噪比,因此特別適用于對(duì)細(xì)胞膜附近區(qū)域進(jìn)行高分辨率成像。
WF(寬場(chǎng)照明成像模式):寬場(chǎng)顯微鏡是一種常用的成像技術(shù),其適用范圍廣泛,包括組織切片、活細(xì)胞、固定細(xì)胞等樣品的觀察。雖然其分辨率較超分辨技術(shù)略低,但因其操作簡(jiǎn)單、成本較低,仍然是實(shí)驗(yàn)室常用的成像工具。
除了上述幾種模式外,超分辨顯微鏡還包含其他多種成像模式,每種模式都有其特定的應(yīng)用場(chǎng)景和優(yōu)勢(shì)。在實(shí)際應(yīng)用中,研究者應(yīng)根據(jù)研究目標(biāo)和樣品特性選擇合適的成像模式,以獲得更好的成像效果。
值得注意的是,隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,超分辨顯微鏡的成像模式也在不斷更新和完善,新的成像模式和技術(shù)不斷涌現(xiàn),為科研工作者提供了更多的選擇和可能性。