激光共聚焦顯微鏡測試樣品的要求可以細(xì)分為生物樣品和材料樣品兩大類,具體要求如下:
生物樣品
熒光表達(dá)觀察:
樣品應(yīng)先在熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)是否正常,以確定是否有必要使用激光共聚焦顯微鏡進(jìn)行進(jìn)一步分析。
蓋玻片厚度:
蓋玻片的厚度要求≤0.17mm,以確保測試的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。
激發(fā)波長和發(fā)射波長:
需要明確樣品的激發(fā)波長和發(fā)射波長,這是進(jìn)行激光共聚焦顯微鏡測試的關(guān)鍵參數(shù)。
掃描區(qū)域設(shè)置:
如果需要進(jìn)行重構(gòu),需要明確掃描區(qū)域的大小、位置和Z步進(jìn),這些參數(shù)會直接影響測試時間和結(jié)果的精度。
樣品固定:
樣品B須貼壁良好,不能懸浮起來。在載玻片上固定好樣品后,再送樣測試。
抗熒光淬滅劑:
進(jìn)行顯微成像時,樣品需要加抗熒光淬滅劑,并且蓋玻片需要固定,以減少熒光信號的損失。
材料樣品
樣品制備:
材料樣品需要提前制備好,以滿足測試需求。
尺寸與平整度:
樣品尺寸沒有具體要求,但樣品B須平整,以確保測試的準(zhǔn)確性和圖像質(zhì)量。
成像范圍:
拍出來的圖像*大面積在1.11x1.8mm到5x5mm范圍內(nèi),顏色可調(diào),以滿足不同的測試需求。
其他注意事項(xiàng)
熒光染料選擇:如果同一樣品中有多種熒光染料,應(yīng)盡可能避免它們的發(fā)射波長重疊,以防止交叉顏色問題。
觀察模式:激光共聚焦顯微鏡通常配備多種觀察模式,應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的觀察模式。
操作環(huán)境:在操作過程中,應(yīng)保持顯微鏡和樣品的清潔,避免灰塵和雜質(zhì)對測試結(jié)果的影響。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡測試樣品的要求涉及樣品的準(zhǔn)備、固定、激發(fā)與發(fā)射波長的選擇、掃描區(qū)域的設(shè)置以及操作環(huán)境等多個方面。只有嚴(yán)格按照這些要求進(jìn)行操作,才能獲得準(zhǔn)確、可靠的測試結(jié)果。