生物顯微鏡使用中央遮光板或暗視野聚光器（常用的是拋物面聚光器），使光源的中央光束被阻擋。不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光線改變途徑，傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上，標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)，因而整個(gè)視野是黑暗的。

在暗視野中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像，并非物體本身，所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng)，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時(shí)，并大于1/2波長(zhǎng)，則各級(jí)衍射光線同時(shí)進(jìn)入物鏡，在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)，但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng)，這是普通顯微鏡（分辨力為0.2um）所不具有的特性，可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。

生物顯微鏡日常維護(hù)及注意事項(xiàng)：

1、所有鏡頭表面必須保持清潔，落在鏡頭表面的灰塵，可用吸耳球吹去，也可用軟毛刷輕輕的攤?cè)サ簟?/span>

2、當(dāng)鏡頭表面沾有油污或指紋時(shí)，可用脫脂棉蘸少許無(wú)水乙醇的混合液（3：7）輕輕擦拭。

3、不能用有機(jī)溶液清擦其它部件表面，特別是塑料零件，可用軟布蘸少量中性洗滌劑清擦。

4、在任何情況下操作人員不能用棉團(tuán)、干布?jí)K或干鏡頭紙擦試鏡頭表面，否則會(huì)刮傷鏡頭表面，嚴(yán)重?fù)p壞鏡頭，也不要用水擦試鏡頭，這樣會(huì)在鏡頭表面殘留一些水跡，因而可能滋生霉菌，嚴(yán)重?fù)p壞顯微鏡。

5、儀器工作的間歇期間，為了防止灰塵進(jìn)入鏡筒或透鏡表面，可將目鏡留在鏡筒上，或蓋上防塵塞，或用防塵罩將儀器罩住。

6、微鏡盡可能不移動(dòng)，若需移動(dòng)應(yīng)輕拿輕放，避免碰撞。

7、不允許隨意拆卸儀器，特別是中間光學(xué)系統(tǒng)或重要的機(jī)械部件，以免降低儀器的使用性能。