這幾種顯微鏡都是光學(xué)顯微鏡,以可見(jiàn)光為探測(cè)手段,不同于電子顯微鏡、掃描隧道顯微鏡、原子力顯微鏡等。
具體地說(shuō):
相差顯微鏡,又稱相襯顯微鏡。因?yàn)楣饩€在穿過(guò)透明的樣品時(shí)會(huì)產(chǎn)生微小的相位差,而這個(gè)相位差可以被轉(zhuǎn)換為圖象中的幅度或?qū)Ρ榷鹊淖兓@樣就可以利用相位差來(lái)成像。是二十世紀(jì)三十年代弗里茨·澤爾尼克在研究衍射光柵的時(shí)候發(fā)明的。因此榮獲1953年的諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。目前被廣泛應(yīng)用于為透明標(biāo)本如活體細(xì)胞和小的器官組織提供對(duì)比度圖像。
共聚焦顯微鏡:是一種利用逐點(diǎn)照明和空間針孔調(diào)制來(lái)去除樣品非焦點(diǎn)平面的散射光的光學(xué)成像手段,相比于傳統(tǒng)成像方法可以提高光學(xué)分辨率和視覺(jué)對(duì)比度。從一個(gè)點(diǎn)光源發(fā)射的探測(cè)光通過(guò)透鏡聚焦到被觀測(cè)物體上,如果物體恰在焦點(diǎn)上,那么反射光通過(guò)原透鏡應(yīng)當(dāng)匯聚回到光源,這就是所謂的共聚焦,簡(jiǎn)稱共焦。共焦顯微鏡在反射光的光路上加上了一塊半反半透鏡(dichroic mirror),將已經(jīng)通過(guò)透鏡的反射光折向其它方向,在其焦點(diǎn)上有一個(gè)帶有針孔(Pinhole),小孔就位于焦點(diǎn)處,擋板后面是一個(gè)光電倍增管(photomultiplier tube,PMT)。可以想像,探測(cè)光焦點(diǎn)前后的反射光通過(guò)這一套共焦系統(tǒng),必不能聚焦到小孔上,會(huì)被擋板擋住。于是光度計(jì)測(cè)量的就是焦點(diǎn)處的反射光強(qiáng)度。其意義是:通過(guò)移動(dòng)透鏡系統(tǒng)可以對(duì)一個(gè)半透明的物體進(jìn)行三維掃描。這樣的構(gòu)想,是在1953年, 美國(guó)學(xué)者馬文·明斯基提出,經(jīng)過(guò)了30年的發(fā)展,才利用激光為光源,發(fā)展出符合馬文·明斯基理想的共聚焦顯微鏡。
倒置顯微鏡:組成和普通顯微鏡一樣,只不過(guò)物鏡與照明系統(tǒng)顛倒,前者在載物臺(tái)之下,后者在載物臺(tái)之上。方便操作和其他相關(guān)圖像采集設(shè)備的安裝。
光學(xué)顯微鏡是一種利用光學(xué)透鏡產(chǎn)生影像放大效應(yīng)的顯微鏡。由物體入射的光被至少兩個(gè)光學(xué)系統(tǒng)(物鏡和目鏡)放大。首先物鏡產(chǎn)生一個(gè)被放大實(shí)像,人眼通過(guò)作用相當(dāng)于放大鏡的目鏡觀察這個(gè)已經(jīng)被放大了的實(shí)像。一般的光學(xué)顯微鏡有多個(gè)可以替換的物鏡,這樣觀察者可以按需要更換放大倍數(shù)。這些物鏡一般被 安置在一個(gè)可以轉(zhuǎn)動(dòng)的物鏡盤(pán)上,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡盤(pán)就可以使不同的目鏡方便地進(jìn)入光路。物理學(xué)家發(fā)現(xiàn)了放大倍率與分辨率之間的規(guī)律,人們才知道光學(xué)顯微鏡的分辨率是有極限的,分辨率的這一極限限制了放大倍率的無(wú)限提高,1600倍成了光學(xué)顯微鏡放大倍率的*高極限,使得形態(tài)學(xué)的應(yīng)用在許多領(lǐng)域受到了很大限制。
光學(xué)顯微鏡的分辨率受到光波長(zhǎng)的限制,一般不超過(guò)0.3微米。假如顯微鏡使用紫外線作為光源或物體被放在油中的話,分辨率還可以得到提高。這一平臺(tái)成為搭建其他光學(xué)顯微系統(tǒng)的基礎(chǔ)。